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    使用液相色譜法測定動物源食品中的氮哌酮及其代謝物殘留

    提供者:上海斯邁歐分析儀器有限公司   發布時間:2021/12/3 20:31:14  閱讀次數:77次   進入該公司店鋪

     言:氮哌酮 (Azaperone) 是一種丁酰苯類神經安定藥,動物經肌肉注射此藥后可消 除緊張感、降低活動力,使動物對環境淡漠并處于安靜狀態,在長途運輸 中常常給豬等動物使用該藥。氮哌醇 (Azaperol) 是氮哌酮在動物體內的代謝產 物,與原形藥物氮哌酮的化學結構相近。通過食物鏈,氮哌酮及其代謝產物氮 哌醇會在人體內蓄積,對人體產生直接的危害,其不良反應主要體現為心血管 效應,用藥后動脈壓下降,皮膚血管擴張使皮膚成粉紅色,心率和心輸出量 減少。 本文所述方法參照 GB29709-2013,建立了動物源食品中氮哌酮及其代謝物分析 的液相色譜法。本方法適用于豬的肌肉、肝、腎中氮哌酮和氮哌醇殘留量 的檢測。方法利用 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取小柱對樣品進行凈化,并 利用安捷倫的 Agilent Poroshell 120 EC-C18 快速柱對目標物進行快速分析。

     

    氮哌酮及其代謝物分析 對試樣進行樣品處理:稱取 5 ± 0.05 g 試樣于 50 mL 離心管中,加 10 mL 乙腈, 渦旋 1 min,超聲 10 min,5000 r/min 離心 5 min,取上清液于 50 mL 離心管中; 殘渣中加 10 mL 乙腈,重復提取一次,合并兩次提取液,于 45 °C 氮氣吹掃至近 干;加 5 mL 2% 甲酸水溶液于離心管中,渦旋 1 min,超聲 5 min 使充分溶解,加 10 mL 正己烷,振蕩 5 min,5000 r/min 離心 5 min,棄掉上層正己烷層(包含兩相 間的脂肪膜),用氮氣吹掃去除殘余的正己烷,備用。

     

    所得樣品提取液經 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取小柱 凈化和富集后(圖 1 所示為固相萃取操作流程),使用配備 了 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色譜柱的液相色譜系統 對其中的氮哌酮及其代謝物進行快速分析(表 1 所示為高 效液相色譜分析條件)。

     

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    本方法在 GB29709-2013 基礎上進行了處理和檢測方法 的優化,在目標物回收率的情況下,顯著降低了各種 組織來源的本底干擾,能獲得更低的檢測限,同時使分析 方法更加穩定準確,如圖 2-4 所示。方法中利用 Bond Elut Plexa PCX 固相萃取小柱對樣品進行凈化,并利用安捷倫的 Poroshell 120 EC-C18 快速柱對目標物進行快速分析, 方法檢測限為 2 µg/kg,定量限為 5 µg/kg;50 µg/kg 加標 水平的豬腎樣品連續進樣六次考察重現性,氮哌醇峰面積 RSD 值為 0.76%,氮哌酮峰面積 RSD 值為 0.53%,結果表現 出高的重現性,如圖 5 所示;在 12.5-1000 ng/mL 線性范 圍內氮哌醇和伊氮哌酮的線性相關性良好,如圖 6 所示; 在 5-100 µg/kg 的加標水平下,氮哌酮和氮哌醇的回收率為 58.9%-83.8%,RSD 為 0.9%-7%,如表 2-3 所示。

     

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    本方法與 GB 29709-2013 相比,采用了 Bond Elut Plexa PCX 固相萃取小柱對樣品進行凈化,并利用安捷倫的 Poroshell 120 EC-C18 快速柱對目標物進行快速分析。Plexa PCX 填料是新型的聚合物陽離子交換填料,具有更高 的萃取效率。Poroshell 120 EC-C18 快速柱與常規分析柱相比, 在提高柱效的同時顯著地縮短了分析時間,這在高通量檢 測方面有重要意義。本方法簡化了萃取凈化的步驟,提高了處理和色譜分析效率,滿足國家標準方法要求的 檢測限和定量限,獲得了較高的回收率與穩定性。因此采 用 Bond Elut Plexa PCX 固相萃取小柱和 Poroshell 120 EC-C18 色譜柱,能夠滿足 GB29709-2013 規定的對動物源食品中氮 哌酮及其代謝物的測定要求。

     

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